Diagnostika prefertilizácie ponúka možnosť genetického vyšetrenia ženy vajcia ako súčasť mimotelové oplodnenie (IVF). Skúšky sa vykonávajú na chromozómy 1. a 2. polárneho tela, ktoré sa tvoria v priebehu 1. a 2. dozrievania delením po zavedení samca spermie do vajca. Výhodou tejto metódy je, že nejde o preimplantačnú genetickú diagnostiku (PGD) de iure, pretože vyšetrenie sa vykonáva pred fúziou ženských a mužských jadier, takže v niektorých krajinách so zákazom PGD je povolená preferenčná genetická diagnostika.
Čo je diagnostika preferilizácie?
Diagnostika prefertilizácie ponúka možnosť genetického vyšetrenia ženy vajcia v kontexte mimotelové oplodnenie. Diagnostika prefertilizácie vytvára možnosť detegovania chromozomálnych aberácií na haploidnom genóme ženského oocytu v kontexte mimotelové oplodnenie (IVF). Najmä numerické odchýlky určitých chromozómy (aneuploidia) a možno zistiť abnormality určitých génov, ktoré spôsobujú dedičné choroby. Keď muž spermie sa zavádza do cytoplazmy vajíčkovej bunky počas IVF, toto najskôr iniciuje 1. a 2. delenie dozrievania (meióza I a II) vo vaječnej bunke. V každom prípade dva „nadbytočné“ bunky, polárne telá, ktoré majú identickú sadu chromozómy ako samotný oocyt, sa tvoria rozdelením. Polárne telá, ktoré by telo za normálnych okolností rozložilo, sú odstránené pólovým telesom biopsia pre analýza chromozómov. Pretože diagnostika preferencie sa vždy vykonáva na polárnych telieskach, postup sa nazýva aj diagnostika polárnych teliesok (PCD). Výhodou vyšetrovacej metódy je, že sa môže vykonávať aj v niektorých krajinách, kde je zakázaná predimplantačná genetická diagnostika (PGD), pretože vyšetrenie sa vykonáva na genóme vaječnej bunky, keď sa jadrá spermie bunka a vaječná bunka ešte nie sú spojené. Nevýhodou je, že je možné skúmať iba chromozomálne aberácie materského genómu. Touto metódou nie je možné detekovať chromozómy spermií zavedených do cytoplazmy vaječnej bunky. Ochorenia spojené s Y sa nedajú zistiť, pretože haploidná chromozómová sada oocytov nemôže obsahovať Y chromozóm.
Funkcia, účinok a ciele
Diagnostika preferencie vo forme genetického testovania polárneho tela dokáže zistiť numerické abnormality (aneuploidia) v určitých chromozómoch materského genómu, ako aj translokácie, pri ktorých sa chromozómové segmenty oddelili a znovu vložili na nesprávne miesto. Okrem toho X-viazané gen možno diagnostikovať mutácie, ktoré sú zdedené matkou a sú založené na mutácii jedného génu (monogenetické ochorenie). To si vyžaduje, aby mohla byť známa dedičná choroba, aby bolo možné zamerať sa na konkrétnu chorobu gen na X chromozóme. V prípade recesívneho dedičstva existuje šanca, že X chromozóm polárneho tela - a teda aj X chromozóm oplodneného vajíčka - obsahuje zdravú alelu zodpovedajúcej gen. Samotný postup zahŕňa polárne telo biopsia, v ktorom sú dve haploidné polárne telieska odstránené z vajíčka a chromozómy sú potom vystavené FISH (fluorescenčná hybridizácia in situ) testovanie. The biopsia predstavuje pre laboratórne vykonávajúce test obrovskú výzvu, pretože identifikácia a izolácia polárnych telies si vyžaduje určité množstvo skúseností. Pre testovací postup FISH sú pre vybrané chromozómy k dispozícii takzvané sondy DNA, ktoré sa kombinujú so zodpovedajúcimi haploidnými chromozómami, pretože majú komplementárnu aminokyselinovú sekvenciu. DNA sondy sú označené rôznymi fluorescenčnými farbami, aby bolo možné chromozómy následne identifikovať pomocou špeciálneho softvéru a spočítať ich automatizovaným spôsobom. Väčšina chromozomálnych aberácií, ako sú aneuploidie a chromozomálne posuny v chromozóme, je smrteľná. To znamená, že buď sa počas IVF netvorí zygota, alebo embryo je zamietnutý po transplantácia do maternica, alebo je neskoro alebo neskoro potrat. Od frekvencie chromozomálnych aberácií u žien vajcia s vekom sa zvyšuje, dôležitým cieľom diagnostiky preferencie je pozitívny výber oplodnených vajíčok. Iba oplodnené vajíčka s - pokiaľ je to rozpoznateľné - intaktným genómom sú znovu transplantované do maternica. Pozitívny výber je zameraný na zvýšenie tehotenstva miera s po IVF a zníženie miery odmietnutých oplodnených vajíčok a počtu potratov. Ďalším cieľom je vylúčiť dedičné choroby založené na chromozomálnych aberáciách alebo určitých genetických chybách v opätovne transplantovanom oplodnenom vajíčku hneď od začiatku pozitívnym výberom oplodnených vajíčok. Medzi typické dedičné choroby, ktoré je možné testom vylúčiť, patria cystická fibróza, spinálna svalová atrofiaa kosáčikovú bunku anémia.
Riziká, vedľajšie účinky a nebezpečenstvá
Diagnostika preferencie sa vykonáva mimo tela, a preto pre zúčastnenú ženu nepredstavuje žiadne ďalšie fyzické riziká. Drobné fyzické riziká poranenia a infekcie sú spojené iba s odberom vajec. Na rozdiel od PGD, ktoré zahŕňa aj chromozomálne vyšetrenie pomocou FISH testu, v diagnostike preferencie je možné vyšetriť iba chromozomálny a genetický materiál od matky. To znamená, že ak je test FISH negatívny a nie sú diagnostikované žiadne chromozomálne alebo genetické aberácie, môžu mať rodičia príliš pozitívne očakávania týkajúce sa priebehu tehotenstva a následný pôrod. Chromozomálne aberácie otcovského genómu a možné existujúce anomálie chromozómu Y, ktoré môžu spôsobiť dedičné ochorenie súvisiace so pohlavím, sa nezaznamenávajú. V tomto ohľade je prefertilizačná diagnostika ešte neúplnejšia ako PGD, v ktorom je celý genóm embryo môžu byť vyšetrené v štádiu blastuly. Avšak ani v prípade negatívneho PGD nemožno vylúčiť, že sa v genóme vírusu vyskytujú genetické chyby embryo, ktoré môžu spôsobiť zlý vývoj a príp viesť k poruchám po narodení. Test FISH sa môže vždy vzťahovať iba na vybrané chromozómy a gény.
