hemoglobín-haptoglobín komplexný test (HHKT) je diagnostická metóda používaná v gastroenterológii na detekciu črevného (vnútri orgánu) krvácania. Základný princíp tejto imunologickej diagnostickej techniky na detekciu črevné krvácanie je založená na biochemických vlastnostiach látky hemoglobín or haptoglobín (proteín prítomný v krv plazma). Z tohto dôvodu zvýšené hemoglobín-haptoglobín komplexy sa dajú zistiť v črevnom lúmene v prípade črevné krvácanie. Detekcia týchto komplexov sa potom uskutoční pomocou vzorky stolice. Test komplexu hemoglobín-haptoglobín má dôležitý význam pri detekcii chorôb spojených s krvácaním v črevnom trakte. Na základe toho sa napríklad hemoroidy, autoimunitné choroby postihujúce črevo alebo rôzne nádory (črevné polypy; dvojbodka rakovina) je možné zistiť testovacou metódou.
postup
Dôležitým faktorom úspechu pri včasnom odhalení napríklad nádorov v črevnej oblasti je nízke potrebné množstvo krv ktoré je možné zistiť v stolici pomocou tohto imunologického vyšetrenia. Test komplexu hemoglobín-haptoglobín a test hemoglobínu sa uskutočňujú pomocou ELISA. ELISA znamená Enzyme Linked Immunosorbent Assay a odkazuje na imunologickú detekčnú metódu, pri ktorej je špecifická väzbová reakcia medzi protilátky a antigény sa používajú na vizualizáciu vírusy, proteíny or hormóny. ELISA využíva vlastnosti konkrétneho produktu protilátky použili na to, aby sa naviazali na látku (antigén), ktorá sa má zistiť. V závislosti na teste ELISA je možné protilátku alebo antigén vopred označiť enzýmom (potenciálne aktívna štruktúra proteínu). Reakcia urýchlená enzýmom slúži ako dôkaz prítomnosti antigénu. Substrát (východiskový materiál) sa prevedie príslušným enzýmom, takže sa následne reakčný produkt zvyčajne deteguje zmenou farby alebo prítomnosťou fluorescencie. The pevnosť Zmena farby je priamo závislá na množstve antigénu v jamkách, a tak súčasne slúži na kvantitatívne hodnotenie (hodnotenie hmota or koncentrácie vzorky). Komplex hemoglobín-haptoglobín sa trvale vytvára intravaskulárne (vo vnútri) krv plavidlá) únikom hemoglobínu z veku erytrocyty (červené krvinky). V tomto procese sa hemoglobín viaže na β-podjednotku α-haptoglobínu (špeciálna štruktúra haptoglobínu). Tento komplex sa rýchlo vylučuje z krvi retikulohistiocytovým systémom. Retikulohistiocytový systém zahŕňa všetky fagocytové bunky (zachytávajúce bunky), ktoré sú tiež súčasťou bunkovej imunitnej odpovede. Kvôli rýchlemu eliminácia (odstránenie), polčas (čas, v ktorom sa množstvo zníži na polovicu) tohto komplexu je približne desať až 30 minút. V porovnaní s tým je polčas voľného haptoglobínu asi päť hodín. U zdravých jedincov je hladina hemoglobínu-haptoglobínu nižšia ako dva mikrogramy na mililiter krvi. Ak je táto hodnota výrazne zvýšená, existuje 95% pravdepodobnosť črevné krvácanie. Preprava / skladovanie: preprava do 24 hodín, medziskladovanie v chladničke (4 - 8 ° C) do 1 dňa. Ak sa používajú špeciálne systémy zberu, materiál je stabilný ešte 5 dní po odbere vzorky pri izbovej teplote.
Indikácie (oblasti použitia)
- Hemoroidy - v závislosti od štádia hemoroidov je to klinicky relevantné a potenciálne vedúce k príznakom cievny vankúš.
- Crohnova choroba - chronické zápalové ochorenie čriev.
- Ulcerózna kolitída - na rozdiel od Crohnova choroba, ulcerózna kolitída môže byť identifikovaná ako kontinuálne šírenie zápalových infiltrátov po tráviaci trakt.
- Nádory - test komplexu hemoglobín-haptoglobín tu slúži ako špecifická a citlivá metóda na diagnostiku kolorektálnych adenómov a karcinómov. Test komplexu hemoglobín-haptoglobín tu detekuje zvýšené adenómy, a preto sa často kombinuje s imunologickým testom hemoglobínu vo výkaloch, ktorý je citlivejší a špecifickejší pre dvojbodka karcinómy.
Výhody testu s komplexom hemoglobín-haptoglobín.
- Na rozdiel od iných detekčných metód je test komplexu hemoglobín-haptoglobín menej citlivý na vitamín C a mäso, takže pri predchádzajúcom požití nemôže dôjsť k falšovaniu výsledkov testu.
- Vzhľadom na vysokú citlivosť (percento chorých pacientov, u ktorých je choroba zistená použitím testu, tj. Dôjde k pozitívnemu výsledku testu) a špecifickosť (pravdepodobnosť, že sa zistia aj skutočne zdraví ľudia, ktorí dané ochorenie nemajú). ako zdravá v teste) z týchto imunologických metód predstavuje metóda výber prostriedkov na detekciu krv v stolici, pretože je ľahko vykonateľný a môže poskytnúť klinicky zmysluplné výsledky.
- Ďalej má táto metóda výhodu v tom, že pacient nemusí dodržiavať špeciálne pokyny strava. Táto výhoda vyplýva zo skutočnosti, že imunologické metódy fungujú výlučne na princípe vysoko špecifickej väzby protilátky.
- Imunologické testovacie metódy založené na špecifickej detekcii hemoglobínu v stolici majú v porovnaní s inými imunologickými testovacími metódami významné zvýšenie citlivosti a špecifickosti. V rôznych klinických štúdiách sa preukázalo, že tento imunologický test detekuje približne 95% dvojbodka karcinómy (rakovina hrubého čreva a konečníka) a 70% polypy hrubého čreva (výbežky tkaniva do lúmenu hrubého čreva; niektoré typy polypov hrubého čreva sú prekanceróznymi léziami pre karcinóm hrubého čreva). Nevýhodou je bakteriálna degradácia hemoglobínu v čreve, ktorá môže viesť k falošne negatívnym hodnotám u starších (> 24 hodín) vzoriek stolice.
Nevýhody testu komplexu hemoglobín-haptoglobín.
- Pri hodnotení imunologickej metódy je potrebné poznamenať, že v čreve dochádza k bakteriálnej degradácii hemoglobínu. Z tohto dôvodu existuje možnosť falošne negatívnych hodnôt vo starších (viac ako 24 hodín starých) vzorkách stolice.
Interpretácia
Pozitívny výsledok testu si vyžaduje endoskopické vyšetrenie celého hrubého čreva (kolonoskopia). Kolonoskopické vyšetrenie by sa malo vykonať do 31 dní podľa európskych pokynov pre kvalitu. Hodnotenia Výskumného ústavu Kaisera Permanenteho u pacientov s pozitívnym výsledkom testu ukázali, že riziko rakovina hrubého čreva bol zistený počas kolonoskopia sa každý mesiac zvýšila o 3%. Výrazne sa však zvýšila miera nádorov (v porovnaní s pacientmi, ktorí mali a kolonoskopia v prvom mesiaci) bolo možné pozorovať až po 10-mesačnom oneskorení kolonoskopie.
