Morfológia erytrocytov, mikroskopia fázového kontrastu

Fázová kontrastná mikroskopia je diagnostický postup používaný v urológii a nefrológii (štúdium obličiek) na vyšetrenie a hodnotenie cytomorfologických vitálnych vzoriek (vzorka so živými bunkami) pri diagnostike hematúrie a močových sedimentov. Mimoriadny význam tejto metódy spočíva najmä v možnosti diagnostiky hodnotiť morfológiu erytrocytov (tvar červenej krv bunky), ktoré môžu poskytnúť cenné informácie o pôvode možnej hematúrie (krv v moči) alebo erytrocytúrie (červené krvinky v moči). Fázová kontrastná mikroskopia močového sedimentu je ideálny na vyhodnotenie rôznych foriem erytrocyty.Úvod mikroskopia s fázovým kontrastom do rutinnej diagnostiky možno považovať za veľký pokrok, pretože uľahčuje odlíšenie patognomonických zložiek moču od nepatologických artefaktov. Mikroskopia fázového kontrastu je lepšia ako mikroskopia jasného poľa, ktorá sa používala až do zavedenia mikroskopie fázového kontrastu, pokiaľ ide o diferenciáciu artefaktov. Ak je nejasný alebo nepresvedčivý nález, použitie tohto postupu môže ušetriť menej užitočné opatrenia, ako je rádiologická alebo cystoskopická diagnostika (cystoskopia) pre glomerulárnu hematúriu (pozri nižšie), čím sa znížia náklady a ušetrí čas na liečbu.

Indikácie (oblasti použitia)

Mikroskopia fázového kontrastu sa používa v urológii a nefrológii na štúdium morfológie erytrocytov:

• Vyhodnotenie cytomorfologických vitálnych vzoriek pri diagnostike hematúrie a močových sedimentov. Indikácia:> 6-8 erytrocyty/ l detegovateľné v moči alebo v pozitívnom pruhovom teste. V kontexte morfológie erytrocytov sa diferenciácia glomerulárnej hematúrie od nerenálnej erytrocytúrie uskutočňuje detekciou dysmorfnej (glomerulárnej) a eumorfnej erytrocyty.
• Dysmorfná hematúria glomerulárneho pôvodu sa nachádza u pacientov s membránovou a membranoproliferatívna glomerulonefritída, ako aj IgA nefropatia, fokálna a segmentálna nefroskleróza a lupusová nefritída. Pri glomerulárnej hematúrii sú erytrocyty pretláčané cez poškodené bazálne membrány glomerulárnych kapilár, čo spôsobuje poškodenie. Mikroskopicky sa dajú rozpoznať dysmorfné erytrocyty, ktoré sa tiež nazývajú akantocyty (= erytrocyty s ušami „Mickey Mouse“).
• Eumorfná hematúria (postglomerulárna hematúria) sa vyskytuje u pacientov s obličkové cysty pri prasknutí do dutého systému, mechúr Bilharzia, krv prímes z vagíny (vagíny), poranenie po zavedení a katéter močového mechúra, krv poruchy zrážania atď.

postup

Princíp mikroskopie s fázovým kontrastom je založený na interferencii svetelných lúčov v dráhe lúča mikroskopu, čím sa dá dosiahnuť vysoko kontrastný obraz nepoškvrnených buniek. Štruktúra a funkcia mikroskopu s fázovým kontrastom:

• Pre funkciu mikroskopu s fázovým kontrastom sú zvlášť dôležité prstencový otvor, kondenzátor, prstencová fázová doska a objektív. Vložením prstencového otvoru do kondenzátora a fázovej platne do objektívu dôjde k oddeleniu nedifrakčných a difrakčných svetelných lúčov. Výsledné oneskorenie vlnovej dĺžky lúčov rozptýleného svetla evokuje fázový rozdiel, ktorý opticky spôsobí, že štrukturálne detaily skúmaného mikroskopického objektu budú tmavšie ako okolité médium. Fyzicky fáza doštičky previesť rozdiely fázy alebo dráhy na rozdiely amplitúdy. V dôsledku týchto amplitúdových rozdielov sa obraz objektu objaví v mikroskope vzájomným rušením alebo zosilňovaním priamych svetelných lúčov prechádzajúcich cez objekt a ohýbaných na objekte.
• Nevýhodou tohto princípu je teda skutočnosť, že ideálne fázové prípravy nie sú pravidlom, pretože amplitúdové efekty sú zvyčajne superponované na fázové efekty.
• Na základe princípu zobrazovania štruktúr pomocou rozdielov amplitúdy sú existujúce bunkové štruktúry predstavované ako odstupňované odtiene šedej v závislosti od ich vlastnej optickej štruktúry. hustota. Na zlepšenie reprodukcie štruktúr sa používajú tenké prípravky a fáza doštičky je uvedené. V závislosti od povahy jednotlivých fáz doštičky, je možné dosiahnuť pozitívne aj negatívne fázové kontrasty, čo vedie k tomu, že objekty záujmu sú zobrazené tmavšie alebo jasnejšie ako ich okolie.
• Pri mikroskopii s fázovým kontrastom je ďalej dôležité poznamenať, že nekróza (smrť buniek) môže nastať pomerne rýchlo v dôsledku vystavenia svetlu a dodatočného poškodenia životne dôležitých buniek. V dôsledku tohto rýchleho nekróza vývoj, hodnotenie podložných sklíčok sa musí vykonať do jednej až dvoch hodín, aby sa zachovala platnosť diagnostického opatrenia. Toto časové obmedzenie hodnotenia vitálnych vzoriek teda zvyčajne vyžaduje dokumentáciu pomocou mikrofotografie alebo, ak je to potrebné, vykonaním mikrokinematografie. Mikrofotografia je fotografia mikroskopického obrazu zhotovená fotoaparátom pripojeným k mikroskopu. Prostredníctvom mikrokinematografie existuje možnosť zachytiť objekty pod mikroskopickým pozorovaním v pohyblivých obrazoch.