Mikroskopia s fázovým kontrastom je nepostrádateľným diagnostickým postupom v gynekológii, ktorý výrazne uľahčuje vyšetrenie vitálnych buniek v cervikálnom hliene (cervikálny hlien) a vo vaginálnych sekrétoch (vaginálna tekutina). Okrem toho tento postup umožňuje aj hodnotenie spermie (bunky spermy).
Indikácie (oblasti použitia)
- Diagnostika vaginálna flóra - pri vyšetrovaní pošvovej flóry (vaginálnej flóry) sú pomocou mikroskopu s fázovým kontrastom možné nasledujúce vyšetrenia: napríklad diagnostika nedostatku bakteriálnej kolonizácie alebo normálnej vaginálnej flóry (kyselina mliečna baktérie) s alebo bez cytolýzy (deštrukcie buniek) je možné vykonať pomocou tohto diagnostického postupu. Ďalej je možné identifikovať baktérie pri príprave a zaradiť ich do skupín imobilných a pohyblivých baktérií. Navyše, bičíkovce, ako je Trichomonas vaginalis, ktoré patria do skupiny parazitov, sa dajú zvyčajne spoľahlivo zistiť pomocou mikroskopu s fázovým kontrastom. Ďalej mykózy (plesňové choroby) je možné spoľahlivo zistiť pomocou mikroskopie s fázovým kontrastom, takže diagnózu mykózy drozdov je možné stanoviť pomocou mikroskopie s fázovým kontrastom. Na základe týchto diagnostických schopností je zvyčajne možné zistiť infekčnú cervikálnu príčinu sterility.
- Zápalové markery - mikroskopiou s fázovým kontrastom, počtom a typom leukocyty (morfológia leukocytov).
- Stanovenie fázy cyklu - na stanovenie fáz cyklu menštruačného cyklu sa používa vaginálna cytológia. V tomto kroku vyšetrenia sa povrchové (povrchové) bunky vagíny (vagíny) skúmajú mikroskopicky. Hodnotenie buniek poskytuje informácie o súčasnej fáze menštruačného cyklu ženy. Ženský cyklus je rozdelený do dvoch fáz, prvá fáza sa nazýva folikulárna fáza (fáza dozrievania vajíčok) a druhá fáza sa nazýva fáza žltého telieska (corpus fáza luteum). Je však potrebné poznamenať, že stanovenie fázy cyklu pomocou mikroskopie s fázovým kontrastom bolo v súčasnosti do značnej miery nahradené hormonálnou diagnostikou, ktorá zaisťuje vysoký stupeň diagnostickej istoty.
- Sims-Huhnerov test - tento testovací postup, ktorý sa tiež nazýva postkoitálny test, sa používa na zistenie, či spermie (bunky spermií) môžu preniknúť do hlienu krčka maternice (hlien krčka maternice), aby sa dostali do miesta oplodnenia.
- Posúdenie spermie - okrem posúdenia schopnosti spermií preniknúť (prechádzať) cez hlien krčka maternice môže mikroskopia s fázovým kontrastom ďalej skúmať počet spermií, ich pohyblivosť a morfológiu (vzhľad).
- Vyšetrenie sterov - v prípade podozrenia, napríklad na mykózu (plesňové ochorenie), existuje možnosť rozmazania vagíny (vagíny) alebo vulvy (celku vonkajších primárnych sexuálnych orgánov ženy). Pozostáva z: blarney a klitoris) alebo prípadne z análnej oblasti, aby sa odobrali a vyhodnotili mikroskopicky.
Príprava mikrospie s fázovým kontrastom na príklade vyhodnotenia prítomnej pošvovej sekrécie:
- Na začiatku hodnotenia vaginálnych sekrétov mikroskopom s fázovým kontrastom sa pripravuje dva vhodné natívne preparáty (čerstvý, nefixovaný, zvyčajne nefarbený). telesné tekutiny, tkanivá alebo obsah orgánov na mikroskopickú detekciu živých patogénov).
- Pridanie draslík sa uskutoční roztok hydroxidu (KOH) a kuchynská soľ do pošvového sekrétu. Po dokončení miešania sa spojený výlučok nanesie na podložné sklíčko a zakryje sa krycím sklíčkom. Následne je možné vykonať mikroskopické hodnotenie fázovým kontrastom.
postup
Princíp mikroskopie s fázovým kontrastom je založený na interferencii svetelných lúčov v dráhe lúča mikroskopu, čím sa dá dosiahnuť vysoko kontrastný obraz nepoškvrnených buniek. Štruktúra a funkcia mikroskopu s fázovým kontrastom:
- Pre funkciu mikroskopu s fázovým kontrastom sú zvlášť dôležité prstencový otvor, kondenzátor, prstencová fázová doska a objektív. Vložením prstencového otvoru do kondenzátora a fázovej platne do objektívu dôjde k oddeleniu nedifrakčných a difrakčných svetelných lúčov. Výsledné oneskorenie vlnovej dĺžky difrakčných svetelných lúčov spôsobí fázový rozdiel, ktorý opticky urobí štrukturálne detaily mikroskopického objektu, ktorý sa má skúmať, sa javí tmavší ako okolité médium. Fyzicky fáza doštičky previesť rozdiely fázy alebo dráhy na rozdiely amplitúdy. V dôsledku týchto amplitúdových rozdielov sa obraz objektu objaví v mikroskope vzájomným rušením alebo zosilňovaním priamych svetelných lúčov prechádzajúcich cez objekt a ohýbaných na objekte.
- Nevýhodou tohto princípu je teda skutočnosť, že ideálne fázové prípravy nie sú pravidlom, pretože amplitúdové efekty sú zvyčajne superponované na fázové efekty.
- Na základe princípu zobrazovania štruktúr pomocou rozdielov amplitúdy sú existujúce bunkové štruktúry predstavované ako odstupňované odtiene šedej v závislosti od ich vlastnej optickej štruktúry. hustota. Na zlepšenie reprodukcie štruktúr sa používajú tenké prípravky a fáza doštičky je označené. Podľa povahy rôznych fáz doštičky, je možné dosiahnuť pozitívne aj negatívne fázové kontrasty, čo vedie k tomu, že záujmové objekty sú tmavšie alebo svetlejšie ako ich okolie.
- Pri mikroskopii s fázovým kontrastom je tiež dôležité poznamenať, že nekróza (smrť buniek) môže nastať pomerne rýchlo v dôsledku vystavenia svetlu a dodatočného poškodenia životne dôležitých buniek. V dôsledku tohto rýchleho nekróza vývoj, hodnotenie podložných sklíčok sa musí vykonať do jednej až dvoch hodín, aby sa zachovala platnosť diagnostického opatrenia. Toto časové obmedzenie hodnotenia vitálnych vzoriek teda zvyčajne vyžaduje dokumentáciu mikrofotografiou alebo v prípade potreby vykonaním mikrokinematografie. Mikrofotografia je fotografia mikroskopického obrazu zhotovená fotoaparátom pripevneným k mikroskopu. Prostredníctvom mikrokinematografie existuje možnosť zachytiť objekty pod mikroskopickým pozorovaním v pohyblivých obrazoch.
Výhody mikroskopu s fázovým kontrastom:
- Okamžitá diagnostika - časovo nenáročná a lacná na vykonanie.
- Vykonáva sa pomerne ľahko, a preto je rýchlo naučiteľný a učiteľný.
- V závislosti na skúsenostiach skúšajúceho s relatívne dobrou senzitivitou (percento chorých pacientov, u ktorých je choroba zistená použitím postupu, tj. Dôjde k pozitívnemu nálezu) a špecifickosťou (pravdepodobnosť, že v skutočnosti zdraví ľudia, ktorí netrpia príslušné ochorenie tiež zistí ako zdravé) postihnuté
- Diagnóza je možná bez vonkajšej pomoci (tj. Bez laboratória tretej strany).
