postup
Ak sa vykonáva priamy Coombsov test, červená krv bunky sa odfiltrujú z krvi pacienta. Je potrebné vyskúšať, či existujú protilátky typu IgG na nich, ktoré spôsobujú hemolytickú anémiu alebo krv skupinová inkompatibilita v tele. Sérum Coombs obsahuje protilátky proti ľudským IgG protilátkam.
Zmes sa zahrieva (inkubuje) dlhší čas. Ak existujú protilátky na červenú krv bunky, zhlukujú sa a test bude pozitívny. Nepriamy Coombsov test sa skladá z dvoch častí.
Cieľom je stanoviť protilátky, ktoré sú voľne prítomné v krvi a nie sú viazané na krvné bunky. Tentokrát je tekutá časť (sérum) odfiltrovaná z krvi pacienta. Najskôr sa do séra na test pridajú červené krvinky.
Ak sú v sére voľné protilátky, viažu sa na červené krvinky. Táto reakcia nie je viditeľná. Až v druhom kroku, ako v priamom teste Coombs, sa pridá a zahreje sérum Coombs s protilátkami proti ľudským protilátkam. Ak je výsledok pozitívny, roztok sa tiež aglutinuje.
Hodnotenie
Ak sa protilátky kombinujú so zodpovedajúcim sérom Cooms, protilátky séra (tekutá časť krvi) sa viažu s protilátkami pacienta. Protilátky majú štruktúru v tvare Y, čo znamená, že môžu vždy viazať dvoch väzobných partnerov a vzájomne tak vzájomne krížiť červené krvinky. To má za následok veľkú akumuláciu krviniek.
Tieto zhluky sa stanú viditeľnými - krv sa zhlukuje (zhlukuje) a test je pozitívny. Ak pacient nemá protilátky, sérum zostáva tekuté. Nie je vidieť žiadnu zmenu - test je negatívny.
Aké sú alternatívy?
Alternatíva k Coombsov test je imunologický postup ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay), pri ktorom sú určité protilátky označené enzýmom. Táto protilátka sa pridá k testovanému roztoku. Ak označené protilátky reagujú s protilátkami testovaného roztoku, viazaný enzým sa aktivuje a vytvorí farbivo.
Zodpovedajúce skúmavky menia farbu - test je pozitívny. Okrem postupu ELISA existuje aj WESTERN-Blot, ktorý sa často používa ako potvrdzujúci test na pozitívny test ELISA.
