Analýza zamrznutej časti
Je to nevyhnutné, ak chirurg potrebuje informácie o tkanive odstránenom počas operácie, aby mohol rozhodnúť o priebehu zákroku. Napríklad malý zhubný nádor sa odstráni z oblička. Teraz je potrebný rýchly rez, aby sa zistilo, či bol nádor úplne odstránený alebo či na okrajoch vzoriek tkaniva stále existuje obrovské množstvo malígneho tkaniva.
Výsledok vyšetrenia na zamrznutom reze nakoniec určí priebeh operácie a ďalší terapeutický plán pacienta. Ako funguje vyšetrenie zamrznutej sekcie? Do 10 minút sa tkanivo stabilizuje zmrazením na -20 ° C, potom sa na takzvanom mikrotóme urobí rez s hrúbkou 5 - 10 μm. Ten sa položí na sklíčko, malú sklenenú dosku a rýchlo sa zafarbí. Na konci sa nálezy preskúmajú pod mikroskopom a výsledok sa dá okamžite postúpiť na operačnú sálu.
Metódy farbenia
Za posledných 120 rokov sa vyvinulo veľa metód histologického farbenia. Bunkové štruktúry a tkanivá sú rozdelené na bazofilné, acidofilné a neutrofilné bunky na základe farebnej reakcie s farbiacimi látkami. Ďalej existujú aj agyrofilné a nukleofilné štruktúry.
Bazofilné farbivo obsahuje všetko, čo obsahuje kyslú skupinu, a je farbené zásaditým farbivom (napríklad hematoxylínom alebo metylénovou modrou). Štruktúry, ktoré sú acidofilné, sú zásadité, a preto je možné ich zafarbiť eróziou alebo kyslým fuchsínom (kyslé farbivá). Patria sem cytoplazma a kolagén vlákna.
Neutrofilné alebo lipofilné zložky nemôžu reagovať s kyslým ani zásaditým farbivom, a preto nemôžu byť zafarbené. Agyrofilné zložky môžu viazať ióny striebra a prevádzať ich na elementárne striebro. Nukleofilná (jadro = bunkové jadro, milujúce bunkové jadro) farebná reakcia je výsledkom nukleofilných farbív v bunkové jadro. Ide o DNA viažuce alebo zásadité látky, ktoré sa viažu na nukleové kyseliny.
Dnes sú osvedčené metódy chemického farbenia doplnené o imunologické metódy. Reakcia antigén-protilátka sa v tejto technike používa na detekciu určitých vlastností buniek. Reakcia sa potom dá zviditeľniť sofistikovanou technikou.
Často používané metódy farbenia sú: HE farbenie = hematoxylín-eozínové farbenie: Hematoxylín, prírodné farbivo, farbí všetky štruktúry modro, ktoré sú bazofilné (= bázou milujúce), a preto kyslé, ako je DNA, bunkové jadrá, ribozómyEosin sa naproti tomu vyrába synteticky. Eozín zafarbí všetky bunkové štruktúry červenou farbou, ak sú acidofilné (= milujúce kyseliny) alebo zásadité.
proteíny cytoplazmy, mitochondriea kolagén sú medzi nimi. Azánové sfarbenie: Skladá sa z prvých písmen oboch farieb, azokarmínu G a anilínovej modro-zlato oranžovej: Toto sfarbenie bunkové jadro a svalové vlákna červené a cytoplazma načervenalé. kolagén a retikulárne vlákna pri tomto zafarbení zmodrejú.
Na farbenie sa používa farbivo Giemsa (Giemsa's Azure-Eosin-Methylene Blue) krv bunkové nátery. Bunkové jadrá sa dajú ľahko rozpoznať podľa reakcie fialovej farby. Cytoplazma má modrasté škvrny.
Pri farbení elastikou (rezorcinol-fuchsín-orceín) sú všetky elastické vlákna zobrazené čierno-fialovo. Metóda farbenia podľa van Giesona sa vyznačuje skutočnosťou, že farbenie sa najskôr vykonáva hematoxylínom. Potom sa použije fuchsín kyselina pikrová (mikrofuchsín) alebo tiazín kyseliny pikrovej.
Nakoniec sa bunkové jadrá javia ako čierno-tmavohnedé, cytoplazma skôr svetlohnedá. Kontrastné zafarbenie tiazínom kyselinou pikrovou zafarbí elastické vlákna a svalové tkanivo oranžovo-žltou farbou a kolagénové vlákna červenou farbou. Pri trichrómovom farbení podľa Masson-Goldnera je veľkosť molekuly farbiva najdôležitejším faktorom v metóde farbenia.
Používa sa hematoxilín železitý, zvyčajne s tromi ďalšími farbivami, a to kyslá líška, oranžová G a svetlozelená. Farbí sa kolagénne spojivové tkanivo a hlienovo zelené, bunkové jadrá modročierne, cytoplazma červené, svaly bledočervené a červené krv bunky (erytrocyty) oranžovo-červená. Okrem toho existuje Gramovo sfarbenie, ktoré slúži na odlíšenie baktérie.
Gram-pozitívne baktérie sú zafarbené na modro a gramnegatívne baktérie sú zafarbené na červeno. Ziehl-Neelsenovo farbenie sa tiež používa na baktérie, a to tých, ktoré sú odolné voči kyselinám a napríklad aj výstavné tuberkulóza patogény červenou farbou. Ďalšími metódami farbenia, ktoré by sa tu mali spomenúť, sú reakcia Berlin-Blue zodpovedná za detekciu trojmocných iónov železa v tkanivových rezoch a metóda farbenia hematoxylínom železom podľa Heidenhaina.
